GenoStaff cDNA Banken
cDNA Genbanken von Maus und Ratte
Die japanische Firma Genostaff wurde 2002 gegründet und hat sich einen Namen als Dienstleister für die pharmazeutische Industrie im Bereich der in situ Hybridisierung, als auch der Konstruktion von c-DNA Genbanken gemacht. Die ausgezeichnete Qualität der zumeist kundenbezogenen Produkte wird durch die Nennung in vielen hundert Veröffentlichungen in namhaften Journalen, wie Nature, Science, Cell und anderen, 
deutlich. Eine besondere Technik der mRNA Isolierung ermöglicht die Produktion von cDNA Banken dieser hohen Qualitätsstufe. Die gewonnene mRNA wird mit Oligo d(T) Primern in cDNA umgeschrieben. Die cDNA Banken können als Templat in der PCR (und qPCR), für Genexpressionsstudien, für die Herstellung von Sonden, bei Klonierungen, etc. eingesetzt werden. Es sind spezifische cDNA Banken aus verschiedensten Organen von Maus und Ratte verfügbar. Weiterhin können c-DNA Banken aus unterschiedlichen Entwicklungsstadien von Mäuseembryos und Rattenembryos gewählt werden. Alle c-DNA Banken resultieren aus dem Mäusestamm BL/6 bzw. der Wister Ratte.
Bestellinformationen "Maus", Bestellinformationen "Ratte"
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Qualitätskontrolle
| Amplifikation der cDNA durch PCR |
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| Je 1 µl cDNA (25 ng) aus verschiedenen Mäuseorganen wurden in eine PCR eingesetzt. Das Amplifikat ist 436 bp lang (GAPDH). Bedingungen: 1.25 U Taq Polymerase, PCR Instrument: Applied Biosystems 2700 3 Minuten bei 95°C 30 Zyklen: 95°C für 30 Sekunden, 57°C für 30 Sekunden, 72°C für 30 Sekunden 5 Minuten bei 72°C |
| qPCR Amplifizierung und Kalibrierung |
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| „Mouse Universal Reference Total RNA“(Clontech) wurde in eine Reverse Transcription PCR eingesetzt mit zufälligen Primern. Die so gewonnene cDNA wurde als Standard für die Kalibrierungskurve verwendet. |
| Real-Time PCR |
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| Je 2,5 und 25 ng cDNA aus verschiedenen Mäuseorganen und aus Mäuseembryonen wurden in eine qPCR eingesetzt (n=3) Setup: TaqMan® FAST PCR Mix, 10µL TaqMan® Assay(FAM/MGB)*, 1µL Nuclease free water, 8µL Mouse GAPD (GAPDH) Endogenous Control (FAM/MGB Probe, Non-Primer Limited), Applied Biosystems Real Time PCR Instriúment: Applied Biosystems 7500 Fast Programm: 20 Sekunden bei 95°C, 40 Zyklen: 95°C für 3 Sekunden, 60°C für 30 Sekunden. |